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甲真菌病的扫描电镜诊断研究_美容护肤

来源:乌鲁木齐新闻网  日期:2021-11-20  阅读:
甲真菌病的扫描电镜诊断研究_美容护肤 甲真菌病的扫描电镜诊断研究 更新时间:2011-11-15 15:00:55

甲真菌病的扫描电镜诊断研究

中华皮肤科杂志 1998年第5期第31卷 论著摘要

作者:张迎 雷鹏程 谢家仪

单位:100083 北京,北京医科大学第三临床医院皮肤科 [张迎 雷鹏程(指导者)];中国科学院微生物所电镜室(谢家仪)

  甲真菌病是临床常见疾病,目前已有报道采取组织病理学方法对其真菌学检 查进行补充[1~3]提高了诊断率

甲真菌病的扫描电镜诊断研究_美容护肤

。但在实际工作中,组织病理 学方法较为繁琐,为寻找一种更便捷有效的诊断方法,我们进行了甲真菌病的扫描电镜诊断研究。

  一、病例和方法

  (1)病例:我科门诊拟诊为甲真菌病的病例25例,其中男14例,女11例;年龄16~58岁,平 均34.5岁;病程1个月至8年,平均2.6年。25例的病甲均具有甲板增厚、角质松解、色泽 改变、表面不平等特征。2例无全身性和手足甲病的年轻人作为正常人对比。

  (2)取材方法:

  1.常规方法刮取甲屑做真菌镜检和培养。

  2.采用远端修剪法(3例病甲和正常手、足甲各1例)或全甲拔除术(22例病甲)在消毒后以无菌 器械剪下或拔下甲组织块,再以无菌剪将其纵行分为两块,一半置于10%甲醛溶液中留做病 理检查,另一半再剪为3mm×3mm大小的3块放入无菌袋中留做扫描电镜观察。

  (三)检查方法:

  1.koh直接镜检法:刮取甲屑后按常规方法操作。

  2.真菌培养法:甲屑分别接种于含放线菌酮的沙堡培养基和普通沙堡培养基各2~3管,25℃ 孵育20天后鉴定菌种。

  3.组织病理学pas染色法:甲组织块在10%甲醛溶液中固定24小时,再运用10%硝酸水溶液软 化1周,石蜡包埋后切6μm厚的切片5至6张,pas染色后封片光镜下读片。

  4.扫描电镜法:每例甲标本一式3份,按内表面、外表面、断面顺序固定于样品台上,放入e ikoj ib-ⅱ型离子溅射仪中喷镀金膜后,放入日立s-520扫描电镜进行观察。此方法诊断 甲真菌病的标准是:在甲断面上见到真菌菌丝或胞子,或者在甲板内、外表面见到真菌菌丝 向内穿入

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  3、结果

  (一)koh直接镜检法:25例中20例阳性(80%)。

  (2)真菌培养法:25例中18例阳性(72%),其中皮肤癣菌属8例(红色毛癣菌7例,絮状表皮癣 菌1例),念珠菌属4例,霉菌属4例(曲霉2例,待鉴定2例),混合感染2例。

  (三)组织病理学pas染色法:25例病甲均见有不同程度的角质增厚、松解和甲板空腔、裂 隙,其中23例(92%)于甲组织内检出pas阳性的真菌成分。

  (4)扫描电镜法:25例病甲的内、外表面和断面均见有不同程度的破坏,表现为甲板 不平、沟、嵴、裂隙、孔洞等,而2例正常甲的各个甲面则平整均一。有24例病甲(96% )在断面和(或)内、外表面上检出真菌成份(附表),从而诊断甲真菌病,仅1例病甲在三个甲 面上均未检出真菌成份,此例的koh直接镜检、真菌培养和组织病理学检查均阴性,故提示 极可能不是甲真菌病。2例正常甲的各个甲面均未检出真菌成分。从检出真菌的形态来看, 有些是细长分节规则排列的菌丝,有些则是大量聚集的胞子,据此可以大致粗略 辨别致病真菌的种类,丝状真菌还是酵母菌。

    附表 25例病甲甲面的真菌散布情况

甲 面 真菌成分 内表面 + + - - - 外表面 + - + - - 断 面 + + + + - 例 数 11 9 3 1 1

  3、讨论

  甲真菌病的经典诊断方法是根据病甲的临床特点、手足癣病史、koh直接镜检结果和真菌培 养结果。临床上常在甲下缘内侧或表面伤害处取材进行真菌镜检和培养,当真菌菌丝或孢子 数量过少或位于甲板中层或腔壁时常难于检出[2]。国外报告[ ht6〗[4]直接镜检阳性率为50%~75%,国内报告[1,2 ]为48%~60.77%。真菌培养结果常受到刮取甲屑中菌的活性、培养基的种类 及标本污染的影响而出现假阴性,培养阴性率一般只为25%~80%[5]。而组织病理学方法虽然提高了甲真菌病的诊断率[1,2] ,但存在一定的局限:甲标本取材后制片进程繁琐

甲真菌病的扫描电镜诊断研究_美容护肤

,特别是甲组织的脱钙技术较难掌控,故 在运用中受到一定限制。本文视察证明,扫描电镜方法对甲真菌病的诊断率优于传统的真菌 镜检和培养方法,标本处理又比组织病理学方法简便。本视察中远端修剪法和全甲拔除法取 材的病甲取得一样的诊断效果,故提示临床上可使用远端修剪法获得甲组织。

  志谢 中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所吴绍熙教授审阅参考文献

  1 张文娟, 蔡永明, 桑菊花, 等. 甲真菌病组织病理学检查及其意 义. 中华皮肤科杂志, 1996,29∶352-353.

  2 伍燕兵, 雷鹏程. 甲真菌病的病理学诊断研究. 中华皮肤科杂志, 1996,29∶353 -354.

  3 suarez sm, silvers dn, scher rk, et al. histologic evaluation of nail c lippings for diagnosing onychomycosis. arch dermatol, 1991,127∶1517-1519.

  4 midgely g, daniel cr, miss j. mycology of nail disorders. j am acad der matol, 1994,31∶s68-s74.

  5 davies rr. mycological test and onychomycosis. j clin pathol, 1968,21∶ 729-730.

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